安捷伦1260高效液相色谱仪操作规程
一、概述
安捷伦1260高效液相色谱仪(以下简称HPLC)是一种高效、高灵敏度的分析仪器,能够对复杂样品进行快速、准确的分离和检测。本文详细介绍了HPLC的操作规程,包括仪器的开/关机、系统检查、色谱柱安装、流动相配置、样品制备、色谱条件设置、数据处理等环节。
二、仪器开/关机
- 开机 :
- 关机 :
- 关闭所有模块的电源开关。
- 断开电源插座。
三、系统检查
- 检查流动相 :
- 确保流动相无杂质,无气泡。
- 检查流动相瓶的液位,确保足够。
- 检查色谱柱 :
- 确认色谱柱型号、规格与实验要求相符。
- 检查检测器 :
- 确保检测器清洁,无污染。
- 检查样品瓶 :
- 确保样品瓶干净,无交叉污染。
- 检查废液瓶 :
- 确保废液瓶有足够的空间容纳废液。
四、色谱柱安装
- 拆卸色谱柱 :
- 旋开色谱柱两端的接头。
- 安装色谱柱 :
- 将色谱柱一端插入柱塞,旋紧。
- 将色谱柱另一端插入检测器,旋紧。
- 柱温控制 :
- 设置柱温箱温度,预热至所需温度。
五、流动相配置
- 溶剂选择 :
- 根据实验要求选择合适的溶剂。
- 流动相混合 :
- 按照比例混合溶剂,确保混合均匀。
- 脱气 :
- 使用真空脱气或超声波脱气,去除流动相中的气泡。
六、样品制备
- 样品溶解 :
- 将样品溶解在适当的溶剂中。
- 样品过滤 :
- 使用适当孔径的滤膜过滤样品,去除颗粒物。
- 样品稀释 :
- 如有必要,对样品进行适当稀释。
七、色谱条件设置
- 流速设置 :
- 根据实验要求设置流速。
- 柱温设置 :
- 设置柱温箱的工作温度。
- 检测器参数设置 :
- 根据样品特性设置检测器的波长、灵敏度等参数。
- 进样量设置 :
- 设置自动进样器的进样量。
- 运行时间设置 :
- 设置色谱分析的总运行时间。
八、样品分析
- 样品进样 :
- 使用自动进样器或手动进样。
- 色谱分析 :
- 启动色谱分析,观察色谱图。
- 数据处理 :
- 使用色谱工作站软件对色谱图进行处理,得到所需的数据。
九、仪器维护
- 色谱柱维护 :
- 定期更换色谱柱,保持柱效。
- 检测器维护 :
- 定期清洁检测器,确保检测精度。
- 流动相过滤 :
- 定期更换流动相过滤器,防止堵塞。
- 系统清洗 :
- 定期对系统进行清洗,去除残留物。
十、安全注意事项
- 操作安全 :
- 操作人员应接受专业培训,熟悉操作规程。
- 化学安全 :
- 使用化学品时,应遵守实验室安全规程。
- 电气安全 :
- 确保仪器接地良好,避免电气事故。
- 废液处理 :
- 按照规定处理废液,避免环境污染。
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